Banco de dados citogenéticos da espécie Pterygoplichthys pardalis (Castelnau 1855) do rio Amazonas

Published: 26 July 2022| Version 1 | DOI: 10.17632/fw562tg9xz.1
Contributors:
Alcimara Guimarães, Luan Aércio, luis rodrigues

Description

O banco de dados refere-se aos principais resultados encontrados após análise de aproximadamente 935 metáfases da espécie Pterygoplichthys pardalis (acari-bodó) do rio Amazonas. Os peixes incluídos nessa pesquisa foram obtidos com pescadores artesanais em quatro localidades: Lago Grande, Lago Pacoval, Arapixuna e Porto dos Milagres, todos no município de Santarém, Pará. Utilizamos os marcadores convencionas da citogenética que inclui a determinação do número diploide (2n), blocos heterocromáticos, regiões organizadoras de nucléolo-NOR, sítios G-C, DNA ribossomal 5S, 18s e regiões teloméricas. Os dados tendem a sustentação da hipótese de que essa espécie apresenta um cariótipo conservador dentro da família Loricariidae uma vez que os marcadores 2n, blocos heterocromáticos e NORs são coincidentes com as espécies basais que compõem esta família. As metáfases mostram cromossomos relativamente grandes quando comparadas a outras espécies de peixes e sem regiões teloméricas intersticiais. Esses dados são úteis para qualquer estudo populacional, rastreamento de variabilidade e relações filogenéticas entre as espécies congêneres.

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Os exemplares testemunho foram coletados sob autorização de licença SISBIO número 82273-1 e encontram-se depositados na Coleção Ictiológica da Universidade Federal do Oeste do Pará (UFOPA). Os peixes foram coletados com auxílio de pescadores artesanais locais através de rede de pesca. Após a coleta, foram transportados vivos para o Laboratório de Genética e Biodiversidade da Universidade Federal do Oeste do Pará, onde foram aclimatados e estimulados com injeção de leveduras para a proliferação mitótica durante o período de 24h (Oliveira et al. 1988). Para as preparações citogenéticas os animais foram anestesiados e eutanasiados conforme os procedimentos recomendados pelo Concea (Concea, 2018). As preparações citogenéticas seguiram o protocolo adaptado de Bertollo et al. (1978). As lâminas com as preparações cromossômicas foram analisadas em microscópio Zeiss Axioskop 40 em coloração convencional com Giemsa a 5% (tampão fosfato pH 6,8), para se estabelecer o número diploide (2n). As melhores metáfases foram fotografadas e editadas com auxílio do programa Adobe Photoshop CS6. Os cromossomos foram pareados e classificados segundo Levan et al. (1964) para montagem do cariótipo. A determinação do número fundamental (NF) deu-se através da contagem dos braços cromossômicos, sendo considerados de dois braços os metacêntricos (m), submetacêntricos (sm), subtelocêntricos (st), já os acrocêntricos (a), foram considerados como portadores de apenas um braço. Para os marcadores cromossômicos foi realizada a detecção das regiões organizadoras de nucléolo – NOR através de nitrato de prata segundo Howell & Black (1980). As regiões de heterocromatina (Banda C) foram detectadas segundo Sumner (1972) com adaptação na etapa de coloração segundo Lui et al. (2012). Seguindo o protocolo de Schweizer (1976), detectou-se as regiões sítio específicas por meio da coloração com fluorocromos DAPI, que marca sítios ricos em pares de bases A-T, e cromomicina A3 que detecta os sítios ricos em G-C. Realizou-se ainda, a detecção dos sítios de DNA ribossomal 5S, 18S e regiões teloméricas através da técnica de hibridização in situ fluorescente (FISH) pelo protocolo de Pinkel et al. (1986).

Institutions

Universidade Federal do Oeste do Para

Categories

Genetics

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